釉成熟蛋白amelotin在大肠杆菌中的表达和纯化

• 作者: 孙岩 张娟娟 曹雪梅 李东亮 李武修 林婷婷 韩婷婷 高玉光
• 来源期刊: 牙体牙髓牙周病学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 小鼠 表达 大肠杆菌 纯化
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 7-10
• 页数: 4页
• 分类号: R780.2
• 字数: 2920字
• 语种: 中文

摘要

目的:观察釉成熟蛋白(amelotin)基因聚合酶链反应产物在大肠杆菌中的表达,并获得纯化的釉成熟蛋白.方法:利用His融合蛋白表达载体pET32a(+)转化大肠杆菌BL21,通过异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导,并改变诱导时间、温度、IPTG浓度来优化表达条件,然后在优化的条件下进行大量表达并收菌;His镍柱纯化表达的蛋白.聚丙烯酰胺凝胶电泳分析蛋白表达、纯化情况.结果:电泳结果分析表明:amelotinPCR扩增产物在大肠杆菌中获得高效表达,大小约4×104,纯化得到的amelotin纯度较高.结论:成功得到纯化的amelotin,为进一步制备抗体奠定基础.