酵母双杂交技术筛选与CVB3 VP1直接作用的细胞蛋白

• 作者: 余克花 刘发娣 刘晶星 徐秋芳 罗军 罗达亚 莫冰 黄孝天
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 酵母双杂交 柯萨奇病毒 CVB3 VP1
• 年，卷（期）: 2009,（10）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 991-995
• 页数: 5页
• 分类号: R373.2+2
• 字数: 3734字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2009.10.017

摘要

目的 以CVB3 VP1为诱饵蛋白,筛选与CVB3 VP1直接作用的人心脏cDNA文库基因,并对阳性cDNA克隆进行初步分析和鉴定.方法 酵母双杂交技术筛选人心脏cDNA文库;经阳性克隆的表型确定、PCR扩增cDNA插入片段和Alu I酶切等试验将阳性克隆归类,并进行测序和同源性比对分析;α-半乳糖苷酶活性定量分析VP1与各阳性蛋白之间相互作用的强弱.结果 在人心脏cDNA文库中筛选到5个阳性克隆,分别为:MNAT1(CAK装配因子),GOLGA2(高尔基体基质蛋白GM130),PHR1(视网膜PH结构域蛋白1),LDB1(LIM结构域结合蛋白1), NADH脱氢酶亚单位4.将筛选的GOLGA2 cDNA新序列提交给NCBI GenBank数据库,获得Accession Number:AY823636;α-半乳糖苷酶定量分析试验进一步证明了MNAT1、GOLGA2、PHR1和LDB1等4个基因与VP1均有较强的相互作用.结论 本研究成功地运用了酵母双杂交技术,以CVB3 VP1为诱饵蛋白,从人心脏cDNA文库中获得5种不同类别的阳性基因:MNAT1、GOLGA2、PHR1、LDB1和NADH脱氢酶亚单位4.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	罗达亚	南昌大学医学院微生物学教研室	30	106	6.0	8.0
2	余克花	南昌大学医学院微生物学教研室	39	134	6.0	9.0
3	罗军	南昌大学医学院微生物学教研室	42	283	9.0	15.0
4	黄孝天	南昌大学医学院	32	107	7.0	8.0
5	刘晶星	上海交通大学医学院病原生物学教研室	4	44	4.0	4.0
6	莫冰	南昌大学医学院微生物学教研室	17	96	6.0	9.0
7	刘发娣	南昌大学医学院微生物学教研室	2	11	2.0	2.0
8	徐秋芳	南昌大学医学院微生物学教研室	1	9	1.0	1.0