新型cry7Ab基因的鉴定、克隆、表达与杀虫活性

• 作者: 宋福平 张杰 束长龙 林毅 邓淑
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 苏云金芽胞杆菌 cry7Ab4基因 克隆表达 杀虫活性
• 年，卷（期）: 2009,（5）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 908-913
• 页数: 6页
• 分类号: S188
• 字数: 3532字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2009.05.027

摘要

应用PCR-RFLP法鉴定出苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)HQ40中含有cry7Ab基因,并根据cry7A全长基因序列设计特异性引物,成功地克隆了该基因.该基岗核苷酸序列已在GenBank中登录,登录号为EU380678,并由Btδ-内毒素基因同际命名委员会正式命名为cry7Ab4.通过穿梭载体pSTK将该基因导入Bt无晶体突变株中,获得工程菌HDTAb4.SDS-PAGE分析表明,cry7Ab4基因在其中能正常表达,并形成菱形晶体.提取工程菌HD7Ab4和野生菌HQ40晶体蛋白,并在体外用胰蛋白酶酶解活化.分别对直翅目、鳞翅目和鞘翅目的害虫进行了杀虫活性测定.结果表明,Cry7Ab4蛋白trypsin酶解液对鞘翅目的大猿叶甲(Colophellus bowringi)显示了一定的杀虫活性,其野生菌蛋白及表达蛋白酶解液LC50分别为231.59μg/mL和293.79μg/mL.但对鳞翅目的小菜蛾(Plutella xylostella)、甜菜夜蛾(Spadoptem exigua)、亚洲玉米螟(Ostnnia fur-nacalis)、马铃薯甲虫(Lcptinotarsa decemlineata)、榆蓝叶甲(Pfrhalta aenescens)和直翅目的东亚飞蝗(Oroental migratory locust)基本无杀虫活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	林毅	华侨大学化工学院生物工程与技术系	42	230	10.0	13.0