MiR-122稳定转染细胞系的建立及其脂代谢特征

• 作者: 孙树汉 张玲 杨富 殷一旋 王芳 章亚南
• 来源期刊: 第二军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 人miR-122 稳定转染 脂代谢 嘌呤霉素 HepG2细胞
• 年，卷（期）: 2009,（7）
• 所属期刊栏目: 研究快报
• 页码范围: 825-829
• 页数: 5页
• 分类号: R589.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1008.2009.00825

摘要

目的:利用稳定表达人miR-122前体的表达载体,转染低表达miR-122的人肝癌细胞系HepG2细胞,获得过量表达miR-122的稳定转染细胞系,探讨miR-122对肝脏细胞脂代谢的影响及其机制.方法:对已构建完成的表达质粒pEZX-hsa-mir-122和对照质粒pEZX-mir-control进行酶切鉴定,对酶切正确的克隆进行DNA测序,测序正确的克隆应用脂质体试剂转染,绿色荧光蛋白表达监测转染效率,应用嘌呤霉素筛选稳定转染细胞系,实时定量PCR在RNA水平鉴定miR-122的表达,蛋白质印迹法从靶分子水平验证miR-122的抑制功能,尼罗红染色观察细胞内脂质.结果:pEZX-hsa-mir-122质粒成功转染HepG2细胞,质粒携带的miR-122前体序列整合到细胞基因组中,获得过量表达miR-122的HepG2细胞株,细胞内成熟体miR-122可抑制靶基因的翻译,细胞内脂质明显增加.结论:人miR-122前体序列可整合在HepG2细胞基因组中,过量表达miR-122的HepG2细胞出现脂质代谢异常.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙树汉	第二军医大学基础部医学遗传学教研室	158	1064	16.0	23.0
2	王芳	第二军医大学基础部医学遗传学教研室	45	213	8.0	11.0
3	张玲	第二军医大学基础部医学遗传学教研室	89	1194	18.0	32.0
4	章亚南	第二军医大学基础部医学遗传学教研室	4	7	2.0	2.0
5	杨富	第二军医大学基础部医学遗传学教研室	9	25	3.0	4.0
6	殷一旋	第二军医大学基础部医学遗传学教研室	1	4	1.0	1.0