PRRSV NSP2基因在重组杆状病毒中的表达与鉴定

• 作者: 姜平 宋艳华 李军星 李文良 李玉峰 王先炜 王海燕
• 来源期刊: 中国预防兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪繁殖与呼吸综合征病毒 NSP2 杆状病毒
• 年，卷（期）: 2009,（7）
• 所属期刊栏目: 病毒及其病原生物学
• 页码范围: 509-512
• 页数: 4页
• 分类号: S855.3
• 字数: 2768字
• 语种: 中文

摘要

为研究猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)非结构蛋白2(NSP2)之间的差异和生物学特性,本研究根据PRRSV、S1、SY0608株NSP2基因序列保守区设计引物,通过RT-PCR扩增出两毒株的NSP2基因,克隆到pFastBacTM HTB杆状病毒载体中,将筛选的阳性重组载体pF-SI-NSP2和pF-SY-NSP2,分别转化至含有杆状病毒穿梭载体的DH10Bac感受态大肠杆菌中,经蓝白菌落筛选和PCR鉴定,获得重组表达载体rBac-S1-NSP2和rBac-SY-NSP2.在脂质体介导下转染Sf9昆虫细胞,获得重组杆状病毒rAc-S1-NSP2和rAe-SY-NSP2,Westernblot和间接免疫荧光实验结果表明,本研究成功构建了表达PRRSV S1和SY0608株NSP2蛋白的重组杆状病毒,表达的蛋白与自然感染PRRSV的猪血清均具有良好的反应原性,为进一步研究NSP2蛋白的功能及生物学和免疫学特性奠定了基础.