极端嗜热菌Thermus thermophilus HB 27中天冬氨酸激酶在大肠杆菌中表达、纯化及酶学性质研究

• 作者: 夏勇 孟凡国 李敬坡 蔡平 许维岸 韩宏岩
• 来源期刊: 山东农业大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 天冬氨酸激酶 Thermu sthermophilus HB27 表达 纯化 酶学性质
• 年，卷（期）: 2009,（4）
• 页码范围: 479-483,488
• 页数: 6页
• 分类号: Q814
• 字数: 5223字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2324.2009.04.001

摘要

为获得具有热稳定性的天冬氨酸激酶,从极端嗜热菌 Thermus thermophilus HB27基因组中扩增出天冬氨酸激酶(AK)基因,构建重组质粒,并在Escherichia coli BL21 (DE3)中进行表达,得到了较高的表达量.经热处理纯化后测定重组天冬氨酸激酶(tAK)的最适pH为7.5,最适反应温度为80 ℃, 80 ℃半衰期是18 h.酶动力学分析表明tAK的KmATP为0.23 mmol/L,Vmax ATP为840.34 nmol/(L·min),KmAsp为0.95 mmol/L,VmaxAsp为190.76 nmol/(L·min).赖氨酸和甲硫氨酸对tAK活性没有抑制作用,当苏氨酸浓度大于0.5 mmol/L时,对tAK活性有明显抑制作用,并且抑制作用与苏氨酸呈现浓度依赖性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	韩宏岩	苏州大学医学部基础医学与生物科学学院	21	81	5.0	8.0
2	许维岸	苏州大学医学部基础医学与生物科学学院	23	97	6.0	8.0
3	蔡平	苏州大学金螳螂城市建设学院	138	734	14.0	20.0
4	孟凡国		6	29	3.0	5.0
5	李敬坡	苏州大学金螳螂城市建设学院	1	2	1.0	1.0
6	夏勇		1	2	1.0	1.0