嗜热脂肪地芽孢杆菌NAD激酶克隆表达及酶学性质研究

• 作者: 侯堃 侯立琪 李红梅
• 来源期刊: 工业微生物
• 关键词: 嗜热脂肪地芽孢杆菌 NAD激酶 克隆表达 酶学性质
• 年，卷（期）: 2014,（6）
• 所属期刊栏目: 研究与应用
• 页码范围: 39-44
• 页数: 6页
• 字数: 4430字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-6678.2014.06.007

摘要

NAD激酶能催化NAD生成NADP.本研究采用PCR技术从嗜热脂肪地芽孢杆菌基因组中获得NAD激酶基因,以pET30a(+)为表达载体、E.coli BL21(DE3)为宿主菌,实现其在大肠杆菌中异源表达,并进行酶学性质研究.结果显示,嗜热脂肪地芽孢杆菌中NAD激酶编码基因大小为816 bp,酶分子量大约为35 kD.酶学性质分析表明,来源于嗜热脂肪地芽孢杆菌的NAD激酶最适反应温度和pH分别为35℃、pH 7.5,在35℃中保温2h后仍能保持80％左右的活性.Mn2+、Ca2+对该酶有较强的激活作用,在最适反应条件下该酶的比活力为4.43 U/mg.动力学性质分析结果显示NAD激酶对底物NAD催化的Km和Vmax分别为1.46 mmol/L和0.25 μmol/(L·min).NAD激酶在大肠杆菌的异源表达为以NAD为底物生物合成NADP提供了更多生物资源.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李红梅	上海理工大学医疗器械与食品学院	37	126	6.0	8.0
2	侯堃	上海理工大学医疗器械与食品学院	4	17	3.0	4.0
3	侯立琪		2	10	2.0	2.0