解淀粉芽孢杆菌凝乳酶的克隆、重组表达及酶学性质

• 作者: 丁重阳 张梁 王博达 石贵阳
• 来源期刊: 工业微生物
• 关键词: 大肠杆菌 凝乳酶 克隆表达 纯化 酶学性质
• 年，卷（期）: 2015,（6）
• 所属期刊栏目: 研究与应用
• 页码范围: 9-15
• 页数: 7页
• 字数: 4286字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-6678.2015.06.002

摘要

为了实现解淀粉芽孢杆菌来源凝乳酶的异源表达,并探究重组凝乳酶的酶学性质.以解淀粉芽孢杆菌基因组DNA为模板,扩增得到凝乳酶编码基因proMCE,构建了重组菌株E.coliBL21(pET28 a-proMCE),并成功表达了重组凝乳酶.通过Ni柱亲和层析法纯化具有活性的凝乳酶,分子量大小约为28.5 kDa,纯化后比酶活达到1 096.97 SU/mg,纯化倍数达到4.56倍,回收率为66.51％.对该重组酶酶学性质进行了初步研究,重组凝乳酶分别在70℃、65℃表现最大凝乳酶活力与蛋白酶活力,60℃处理20 min,凝乳酶活力与蛋白酶活力均被钝化80％,为热不定性酶.酶的最适反应pH为5.0.在pH 5～7条件下处理后,凝乳酶活力相对稳定,能保留超过70％的活力.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	丁重阳	江南大学生物工程学院	52	441	12.0	19.0
5	石贵阳	江南大学生物工程学院	128	1034	17.0	24.0
9	张梁	江南大学生物工程学院	86	530	12.0	16.0
13	王博达	江南大学生物工程学院	1	4	1.0	1.0