解淀粉芽孢杆菌中温α-淀粉酶基因的克隆、表达与酶学性质分析

• 作者: 刘洋 沈微 王正祥 石贵阳
• 来源期刊: 工业微生物
• 学科: 生物学
• 关键词: 解淀粉芽孢杆菌 中温α-淀粉酶 基因克隆 酶学性质
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 11-15
• 页数: 5页
• 分类号: Q93
• 字数: 4093字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-6678.2009.01.003

摘要

以中温α-淀粉酶生产菌株 Bacillus amyloliquefaciens M23基因组DNA为模板, PCR扩增得到了2.0 kb α-淀粉酶基因全长序列.该基因由上游启动子220 bp,结构基因1544 bp和终止序列320 bp构成.将无信号肽的α-淀粉酶结构基因 amyQ ,克隆入表达载体 pET28a,转化 E. Coli BL21 (DE3),经诱导,测定α-淀粉酶活性.结果表明:α- 淀粉酶基因 amyQ 获得了活性表达,酶活力为2.297 U/mL,SDS-PAGE电泳结果显示出分子量约为58 kDa特异性蛋白质条带.酶学性质分析表明,重组α-淀粉酶的最适反应温度为60 ℃,最适反应pH为6.5,在60℃保温15 min保持85%以上活性,超过15 min,酶迅速失活,在 pH 5.5～10.0环境下稳定.水解产物分析表明:淀粉水解终产物主要为麦芽寡糖和糊精和少量葡萄糖.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	石贵阳	工业生物技术教育部重点实验室江南大学生物工程学院生物资源与生物能源研究中心	7	42	4.0	6.0
2	沈微	工业生物技术教育部重点实验室江南大学生物工程学院生物资源与生物能源研究中心	4	35	2.0	4.0
3	王正祥	工业生物技术教育部重点实验室江南大学生物工程学院生物资源与生物能源研究中心	8	78	5.0	8.0
4	刘洋	工业生物技术教育部重点实验室江南大学生物工程学院生物资源与生物能源研究中心	1	2	1.0	1.0