嗜热脂肪芽孢杆菌氨基酰化酶在大肠杆菌中的克隆、表达及细胞固定化研究

• 作者: 张培德 苏志鹏
• 来源期刊: 工业微生物
• 学科: 生物学
• 关键词: 嗜热脂肪芽孢杆菌 克隆表达 氨基酰化酶 卡拉胶 渗透交联 固定化
• 年，卷（期）: 2008,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 27-33
• 页数: 7页
• 分类号: Q93
• 字数: 5862字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-6678.2008.05.006

摘要

将嗜热脂肪芽孢杆菌的氨基酰化酶(amaA)基因克隆到E.coli中进行表达,同时利用渗透交联法固定化E.coli细胞,并对固定化细胞氨基酰化酶进行了温度和pH等理化性质的初步探讨.结果显示amaA基因在E.coli中获得了高效表达,酶活性达1043U/g湿菌体.最佳固定化条件为3%卡拉胶,30%细胞.当以1.25%多乙烯多胺渗透交联固定化细胞10min和0.1%戊二醛硬化处理20min,酶学性质研究表明,酶反应的最适温度为65℃,最适pH为7.0.细胞固定化后仍保留有83%活性,pH稳定范围更广,热稳定性更高,55℃酶活性不损失,4℃保存23d仍保留有固定化时73.6%的酶活性,连续10批次转化酶活性仅损失约20%,预示该固定化E.coli具有良好的操作和保存稳定性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	苏志鹏	复旦大学生命科学学院	1	2	1.0	1.0
2	张培德	复旦大学生命科学学院	7	54	3.0	7.0