大鼠新基因PMP22CD的克隆以及多克隆抗体的制备

• 作者: 刘佳佳 刘庆梅 周游 杨世蕊 王明华 郁美香 雷陈
• 来源期刊: 南通医学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: PMP22CD 原核表达 多克隆抗体 聚合酶链反应 免疫抗原
• 年，卷（期）: 2009,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 160-164
• 页数: 5页
• 分类号: R394.3
• 字数: 4548字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7887.2009.03.002

摘要

目的:通过PCR克隆PMP22CD基因,构建原核表达载体PET-32a(+)/PMP22CD,表达并纯化蛋白,制备多克隆抗体,为研究该基因的功能奠定基础.方法:通过PCR的方法克隆PMP22CD基因,选择抗原性较强的C-端,构建原核表达载体PET32a(+)/PMP22CD,在大肠杆菌BL21(DE3 Lysis)中诱导表达,SDS-PAGE分析重组蛋白以包涵体的形式存在,应用电洗脱的方式获得重组蛋白,免疫新西兰大白兔,获得抗血清,通过琼脂糖双扩和Western Blot检测抗血清效价和特异性.结果:经测序鉴定成功克隆PMP22CD基因,并构建PET-32a(+)/PMP22CD重组质粒,表达融合蛋白,免疫新西兰大白兔,获得PMP22CD多克隆抗体.结论:得到了纯化的PET-32a(+)/PMP22CD融合蛋白,获得了效价高、特异性强的抗体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨世蕊	苏州大学基础医学与生物科学学院	2	1	1.0	1.0
2	雷陈	苏州大学基础医学与生物科学学院	2	1	1.0	1.0
3	王明华	苏州大学基础医学与生物科学学院	8	7	1.0	2.0
4	刘佳佳	苏州大学基础医学与生物科学学院	5	67	3.0	5.0
5	周游	苏州大学基础医学与生物科学学院	9	9	2.0	2.0
6	郁美香		2	1	1.0	1.0
7	刘庆梅	苏州大学基础医学与生物科学学院	2	4	1.0	2.0