小反刍兽疫病毒N基因在大肠杆菌中的表达及鉴定

• 作者: 张坤 李伟 李刚 范晓娟 贾凤芹
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 小反刍兽疫病毒 N基因 原核表达
• 年，卷（期）: 2009,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 195-200
• 页数: 6页
• 分类号: S188
• 字数: 5708字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2009.02.003

摘要

参照GenBank中小反刍兽疫病毒((Pesfe des petits rumianats virus,PPRV)N基因序列(Nigeria/75/1)(1878 bp)设计了1对添加EcoR Ⅰ和Nof Ⅰ酶切位点的引物,对从奥地利引进的pCI-nco-PPRN质粒进行PCR扩增,克隆至pGM-T载体,并转化大肠杆菌(Escherichia coli)TOP10感受态细胞,获得重组质粒pGM-T-PPRN.将重组质粒经EcoR Ⅰ和Not Ⅰ双酶切的产物插入原核表达载体pET-32a(+),构建原核表达质粒pET-PPRN,将其转化进BL21(DE3)感受态细胞中后用.IPTG诱导表达,收集菌液进行SDS-PAGE电泳和Westcm blot分析,结果表明,小反刍兽疫病毒N基因在BL21(DE3)成功表达.所表达融合蛋白的相对分子质量约为80 kD,并能被组氨酸单抗、PPRV标准阳性羊血清及PPRV疫苗免疫羊血清所识别.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李刚	中国农业科学院北京畜牧兽医研究所	111	742	14.0	23.0
2	李伟	中国农业科学院北京畜牧兽医研究所	190	2617	29.0	41.0
3	贾凤芹	中国农业科学院北京畜牧兽医研究所	5	7	2.0	2.0
4	范晓娟	中国农业科学院北京畜牧兽医研究所	8	55	4.0	7.0
5	张坤	中国农业科学院北京畜牧兽医研究所	12	96	6.0	9.0