台湾水青冈ISSR-PCR体系的优化

• 作者: 宋文静 李建辉 李钧敏 金则新
• 来源期刊: 福建林业科技
• 学科: 农学
• 关键词: 台湾水青冈 ISSR-PCR体系 优化
• 年，卷（期）: 2009,（2）
• 页码范围: 18-22
• 页数: 5页
• 分类号: S718.43
• 字数: 2940字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-7351.2009.02.004

摘要

分析了ISSR-PCR体系中Mg2+、dNTP和BSA浓度,以及模板DNA、引物和Taq DNA聚合酶用量等6个因素对反应结果的影响,建立了适合于台湾水青冈ISSR-PCR扩增的反应体系:10μL PCR反应液中,含10 ng DNA,1.5 mmol·L-1Mg2+,0.125 mmol·L-1 4×dNTP,1×Tαq DNA聚合酶配套缓冲液(10 mmol·L-1 Tris-HCl,pH值9.0,50 mmol·L-1 KCI,0.1%Triton X-100),0.6 U Tαq DNA聚合酶,2 mg·mL-1 BSA和3pmol引物.应用优化的ISSR-PCR体系从100个ISSR引物中筛选出12个稳定性好,重复性高的引物,对22株台湾水青冈个体的DNA进行扩增,结果表明优化的ISSR-PCR体系完全适合于台湾水青冈的ISSR分析.