人心房肌KChIP2基因表达质粒pEGFP-KChIP2的构建和鉴定

• 作者: 刘智飞 曾晓荣 杨艳 白志茹 裴杰 谭晓秋 陈桂兰
• 来源期刊: 泸州医学院学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 瞬时外向钾通道 心肌细胞 钾通道相关蛋白2 基因克隆
• 年，卷（期）: 2009,（3）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 209-213
• 页数: 5页
• 分类号: Q424
• 字数: 2537字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2669.2009.03.001

摘要

目的:KChIP5作为瞬时外向钾通道(Ito)最重要的辅助亚基,在调控通道基因表达和电流特性中起重要作用.本实验拟构建人心房肌KChIP2基因表达质粒,为研究KChIP2对Ito的调控功能奠定基础.方法:①提取人心房肌总RNA,逆转录得到cDNA;②通过特异性引物进行PCK扩增得到KChIP2编码区全长序列,亚克隆到pMD18-T载体中,得到重组克隆质粒pMD18-T-KChIP2;③再设计带有酶切位点HindⅢ和BamH Ⅰ的特异性引物,对重组克隆质粒pMD18-T-KChIP2进行PCK扩增,得到含有酶切位点的KChIP2编码区全长序列;④对含有酶切位点的KChIP2全长片段和pEGFP-c1进行HindⅢ和BamH Ⅰ双酶切反应,然后进行电泳后胶回收,再进行连接和转化反应;⑤提取质粒,测序鉴定.结果:质粒测序结果与PubMed数据库KChIP2(AY026328)序列比对,同源性为99%.结论:成功构建人心房肌KChIP2基因表达质粒,为下一步转染实验研究KChIP2对瞬时外向钾通道的功能调控奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨艳	泸州医学院心肌电生理学研究室	184	902	14.0	21.0
2	刘智飞	泸州医学院心肌电生理学研究室	53	358	10.0	17.0
3	曾晓荣	泸州医学院心肌电生理学研究室	148	730	12.0	20.0
4	裴杰	泸州医学院心肌电生理学研究室	23	183	7.0	13.0
5	谭晓秋	泸州医学院心肌电生理学研究室	14	60	4.0	7.0
6	白志茹	泸州医学院心肌电生理学研究室	4	7	2.0	2.0
7	陈桂兰	泸州医学院心肌电生理学研究室	5	3	1.0	1.0