pEGFP-C2-MeCP2重组质粒的构建和表达

• 作者: 彭云云 徐涛 李俊 李琳 陈晨 马陶陶 黄成
• 来源期刊: 安徽医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: MeCP2 COS-7 基因表达
• 年，卷（期）: 2014,（9）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 1193-1197
• 页数: 5页
• 分类号: R349.64
• 字数: 4025字
• 语种: 中文

摘要

目的构建人类甲基化CpG结合蛋白( MeCP2)基因的真核表达载体pEGFP-C2-MeCP2,在非洲绿猴肾成纤维细胞(COS-7)中检测其表达及定位。方法从人肝癌细胞(HepG2)中获得cDNA,以其为模板扩增MeCP2全长编码基因,克隆到载体 pEGFP-C2上。构建的重组质粒测序后转染至COS-7细胞中,荧光倒置显微镜观察绿色荧光蛋白的表达,检测MeCP2蛋白定位,Western blot法和RT-PCR法鉴定MeCP2蛋白和基因表达。结果成功构建 pEGFP-C2-MeCP2重组质粒,酶切鉴定片段为1461 bp。 MeCP2蛋白及基因表达水平明显增加。细胞定位实验结果显示MeCP2蛋白定位于胞核。结论成功构建重组质粒 pEGFP-C2-MeCP2,该质粒的构建为进行MeCP2功能研究提供了依据。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李俊	安徽医科大学药学院	493	5712	35.0	53.0
2	黄成	安徽医科大学药学院	52	485	12.0	20.0
6	李琳	安徽医科大学药学院	15	78	4.0	8.0
10	陈晨	安徽医科大学药学院	33	122	6.0	9.0
14	徐涛	安徽医科大学药学院	24	51	4.0	5.0
18	彭云云	安徽医科大学药学院	3	8	2.0	2.0
22	马陶陶	安徽医科大学药学院	13	362	9.0	13.0