人核心蛋白聚糖的克隆及其在大肠杆菌中的表达

• 作者: 李慎涛 温铭杰 王利民
• 来源期刊: 滨州医学院学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 核心蛋白聚糖 原核表达 蛋白纯化 质谱鉴定
• 年，卷（期）: 2009,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 192-194,197
• 页数: 4页
• 分类号: Q78
• 字数: 3111字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-9510.2009.03.011

摘要

目的 在大肠杆菌中高效表达人核心蛋白聚糖,并建立适当的纯化方法,制备重组蛋白.方法 根据GenBank中人核心蛋白聚糖的序列设计特异性引物,从人肝cDNA文库中PCR扩增核心蛋白聚糖的编码序列,克隆到原核表达载体pET42a中,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达后,获得以高效表达的目的 重组蛋白;用SDS-PAGE和质谱鉴定重组蛋白.结果 重组蛋白主要以包涵体形式表达,SDS-PAGE显示其分子质量与预期结果相符;经质谱鉴定,表达的重组蛋白为人核心蛋白聚糖.结论 成功地在大肠杆菌中高效表达了人核心蛋白聚糖,并纯化得到人核心蛋白聚糖蛋白,经鉴定,纯化所得到的蛋白为人核心蛋白聚糖.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李慎涛	首都医科大学基础医学院免疫学系	29	94	5.0	8.0
2	温铭杰	首都医科大学基础医学院免疫学系	19	66	5.0	7.0
3	王利民		2	1	1.0	1.0