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摘要:
目的 构建HIV-1 HXB2株Tat半胱氨酸富集区N端移位突变体,并在大肠杆菌E.coli B121(DE3)中进行高效表达和纯化.方法 应用PCR拼接的方法将首轮合成Tat基因的半胱氨酸富集区(64~111位核苷酸,22~37位氨基酸)移位至缺失半胱氨酸富集区的Tat(AC)的N末端,获得其突变体序列(Tat(CN)DNA),构建其原核表达质粒pET32a-Tat(CN),并转入大肠杆菌E.coli BL21(DE3)中进行诱导表达及纯化,经SDS-PAGE鉴定表达及纯化产物,纯化后的产物用间接ELISA进行鉴定.结果 构建了pET32a-Tat(cn)突变体,pET32a-Tat(CN)融合蛋白在大肠杆菌中表达水平为5.17 mg/nd,相对分子质量为31 ku.间接的ELISA结果表明,pET32a-Tat(CN)能与Tat兔抗血清呈特异反应.结论 成功构建了HIV-1 HXB2株Tat半胱氨酸富集区移位至TatN端的突变体,并能在大肠杆菌中高效表达,其纯化的蛋白pET32a-Tat(CN)很好地保留了与HIV-1 Tat兔抗血清的免疫反应性,为HIV-1 Tat的疫苗基础研究提供了一有价值的研究结论.
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文献信息
篇名 HIV-1 HXB2株Tat半胱氨酸富集区N端移位突变体的构建及在大肠杆菌中的高效表达
来源期刊 安徽医科大学学报 学科 医学
关键词 HIV-1/遗传学 大肠杆菌/遗传学 基因产物,tat 基因表达
年,卷(期) 2009,(1) 所属期刊栏目 基础医学研究
研究方向 页码范围 5-9
页数 5页 分类号 R373.51|R378.2|R394|R392.11
字数 3888字 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1000-1492.2009.01.002
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 潘卫 第二军医大学微生物学教研室 64 255 8.0 12.0
2 邓松华 安徽医科大学病理生理学教研室 34 128 6.0 9.0
3 曹洁 第二军医大学微生物学教研室 110 904 16.0 23.0
4 李存枚 安徽医科大学病理生理学教研室 4 3 1.0 1.0
5 王锦红 第二军医大学微生物学教研室 7 7 2.0 2.0
6 黄德圣 安徽医科大学病理生理学教研室 3 1 1.0 1.0
7 廖文婷 第二军医大学微生物学教研室 5 13 2.0 3.0
8 庞强 第二军医大学微生物学教研室 5 4 1.0 2.0
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研究主题发展历程
节点文献
HIV-1/遗传学
大肠杆菌/遗传学
基因产物,tat
基因表达
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
安徽医科大学学报
月刊
1000-1492
34-1065/R
大16开
合肥市梅山路安徽医科大学校内
26-36
1955
chi
出版文献量(篇)
7450
总下载数(次)
15
相关基金
国家自然科学基金
英文译名:the National Natural Science Foundation of China
官方网址:http://www.nsfc.gov.cn/
项目类型:青年科学基金项目(面上项目)
学科类型:数理科学
国家高技术研究发展计划(863计划)
英文译名:The National High Technology Research and Development Program of China
官方网址:http://www.863.org.cn
项目类型:重点项目
学科类型:信息技术
安徽省自然科学基金
英文译名:Anhui Provincial Natural Science Foundation
官方网址:http://www.ahinfo.gov.cn/zrkxjj/index.htm
项目类型:安徽省优秀青年科技基金
学科类型:
论文1v1指导