口蹄疫病毒非结构蛋白2C主要表位区的原核表达及其单克隆抗体的制备

• 作者: WU Lei 付元芳 刘在新 卢曾军 吴磊 李永亮 田美娜 袁明
• 来源期刊: 中国预防兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 口蹄疫病毒 非结构蛋白2C 大肠杆菌表达 单克隆抗体
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 所属期刊栏目: 免疫学
• 页码范围: 69-73
• 页数: 5页
• 分类号: S852.3
• 字数: 5003字
• 语种: 中文

摘要

本研究制备并鉴定了口蹄疫病毒非结构蛋白2C的单克隆抗体(mAb).以纯化的原核表达2C蛋白免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合,所获得的杂交瘤细胞经间接ELISA法筛选,有限稀释法克隆,直至所克隆的细胞能够100%的分泌抗体,用Dot-ELISA以及IFA对mAbs的特异性等进行鉴定.共获得4株抗重组蛋白2C的mAbs,其亚类鉴定结果3株为IgG1,1株为IgG2b,叠加ELISA初步判定4株单抗所识别表位相同或相近.Dot-ELISA显示这些mAbs与重组2C蛋白和(2C3AB)蛋白以及口蹄疫病毒O/China99感染的BHK-21细胞中的2C抗原均可特异性结合,IFA结果显示所得单抗能与FMDV感染细胞中的2C蛋白特异性结合.本研究获得的针对2C蛋白的特异性mAb,为进一步研究2C蛋白的结构和功能以及诊断方法奠定了基础.