癌症转移相关基因Syntenin1多克隆抗体的制备与鉴定

• 作者: 夏孝强 李芳华 蔡佩玲 陈米娜
• 来源期刊: 四川大学学报（医学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: Syntenin1 融合蛋白 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2009,（6）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 1119-1122
• 页数: 4页
• 分类号: Q784
• 字数: 3652字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-173X.2009.06.034

摘要

目的 获得原核表达GST-Syntenin1融合蛋白,制备高效价的抗Syntenin1多克隆抗体.方法 RT-PCR扩增Syntenin1 cDNA开放阅读框(CDS)序列,亚克隆到编码GST的pGEX-4T-2原核表达载体上,将编码Syntenin1的pGEX-4T-2-Syntenin1重组质粒化学转化BL21(DE3)感受态细胞,IPTG诱导GST-Syntenin1融合蛋白表达,对融合蛋白亲和纯化.SDS-PAGE鉴定后,将纯化的融合蛋白辅以弗氏佐剂,免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,并用Western blot检测抗体效价及特异性.结果 成功制备GST-Syntenin1融合蛋白及多克隆抗体.Western blot结果表明Syntenin1兔多克隆抗体效价可达到1∶20 000,且与Syntenin1蛋白特异结合.结论 成功制备Syntenin1多克隆抗体,为进一步研究Syntenin1基因的功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	夏孝强		1	0	0.0	0.0
2	陈米娜		1	0	0.0	0.0
3	李芳华		1	0	0.0	0.0
4	蔡佩玲		1	0	0.0	0.0