hLMO1编码基因重组质粒的构建及蛋白的表达和定位

• 作者: 刘彤 李丰 蔡鑫泽 顾卉
• 来源期刊: 中国医科大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: hLMO1基因 质粒构建 基因表达与定位
• 年，卷（期）: 2009,（11）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 816-819
• 页数: 4页
• 分类号: Q257
• 字数: 2324字
• 语种: 中文

摘要

目的 构建hLMO1真核表达载体并证实融合蛋白在细胞内的表达及定位.方法 以人胎脑文库cDNA为模板,PCR扩增hLMO1基因cDNA全长,亚克隆至pEGFP表达载体中.将构建的重组质粒进行酶切测序鉴定,并转染到人上皮细胞---HEK293细胞中,提取细胞蛋白进行Western blot检测.利用激光扫描共聚焦显微镜观察pEGFP-hLMO1在HEK293细胞内的定位.结果 hLMO1基因cDNA全长克隆到了真核表达载体pEGFP中,酶切鉴定片段为471 bp.Western blot检测到了融合蛋白表达,分子量约为45 kDa.pEGFR-LMO1在人HEK293细胞核与细胞质均有表达.结论 成功构建了hLMO1基因cDNA全长的真核表达载体,pEGFP-LMO1蛋白定位于HEK293细胞的细胞质和细胞核内.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	蔡鑫泽	中国医科大学附属第一医院中心实验室	10	22	3.0	4.0