聚糖内切酶EGⅢ的克隆及其在酵母中的表达

• 作者: 付永平 付玉芹 国震宇 姚丹 曲靖 王丕武
• 来源期刊: 农业科学与技术（英文版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 绿色木霉 葡聚糖内切酶Ⅲ 大肠杆菌 转化 酶活力
• 年，卷（期）: 2009,（6）
• 所属期刊栏目: 农业生物技术
• 页码范围: 47-49,52
• 页数: 4页
• 分类号: Q94
• 字数: 716字
• 语种: 英文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-4229-B.2009.06.016

摘要

[目的]构建可降解纤维类固体废弃物的工程菌.[方法]采用RT-PER方法克隆了绿色木霉(Trichoderma viride)AS313711的葡聚糖内切酶Ⅲ(EGⅢ)的cDNA,测序后构建到酵母表达载体pESP-2上,并通过电击法将其转到酵母感受态细胞中去,得到酵母表达转化子.通过DNS法测定该转化子在不同温度、不同pH值下酶活力的大小.[结果]EGⅢ的cDNA开放阅读框长度为1 257 bp,编码418个氨基酸,推测蛋白质分子量为44.1×103.在pH值为4.9、温度在60℃条件下,EGⅢ酶活力最高,相对酶活为100%.[结论]获得了高表达效率的EGⅢ-T-pESP-2酵母表达载体,其表达活性要比天然的酶高出3～5倍,只要调节好温度、pH值的关系,可提高纤维素葡聚糖内切酶的下游转化纤维素效率,在大规模生产中生产出大量的葡萄糖.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	姚丹	吉林农业大学农学院	88	473	12.0	16.0
2	王丕武	吉林农业大学农学院	249	1853	20.0	32.0
3	付永平	吉林农业大学农学院	61	206	6.0	11.0
4	付玉芹	吉林农业大学农学院	8	30	4.0	5.0
5	国震宇	吉林农业大学农学院	1	1	1.0	1.0
6	曲靖	吉林农业大学农学院	1	1	1.0	1.0