华根霉前导肽和成熟肽脂肪酶基因的克隆表达及性质研究

• 作者: 徐岩 李飏 王栋
• 来源期刊: 生物技术通报
• 学科: 生物学
• 关键词: 华根霉 前导肽脂肪酶 成熟肽脂肪酶 克隆 表达 性质
• 年，卷（期）: 2009,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 82-86
• 页数: 5页
• 分类号: Q5
• 字数: 3537字
• 语种: 中文

摘要

以华根霉(Rhizopus chinensis CCTCCM201021)为出发菌株,提取总DNA,PCR扩增出前导肽脂肪酶基因(proRCL)及成熟肽脂肪酶基因(mRCL),克隆到原核载体pET-28a,转化E-coli BL21(DE3),诱导表达并纯化出活性目的蛋白.经SDS-PAGE分析,重组蛋白ProRCL和MRCL的分子量分别约43 kD和33 kD.两重组脂肪酶主要酶学性质基本相似,最适反应温度均为35℃,40℃下较为稳定;最适反应pH相近,分别为8.0和8.5;以pNP脂肪酸酯为底物,均对短链脂肪酸酯底物特异性较高.MPCL上述性质与野生型RCL基本一致.研究结果表明,通过条件控制可以利用E.coli表达系统表达具有活性的华根霉前导肽脂肪酶ProRCL和成熟肽脂肪酶MRCL.与米根霉脂肪酶(ROL)不同,前导序列对华根霉脂肪酶的主要酶学特性没有显著影响.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐岩	江南大学生物工程学院教育部工业生物技术重点实验室	233	3264	31.0	46.0
2	王栋	江南大学生物工程学院教育部工业生物技术重点实验室	37	395	12.0	19.0
3	李飏	江南大学生物工程学院教育部工业生物技术重点实验室	1	4	1.0	1.0