诱导温度调控华根霉(Rhizopus chinensis)前导肽脂肪酶的表达及稳定性研究

• 作者: 喻晓蔚 徐岩 王同春
• 来源期刊: 工业微生物
• 学科: 生物学
• 关键词: 华根霉脂肪酶 诱导温度 毕赤酵母 蛋白酶降解 聚合
• 年，卷（期）: 2010,（4）
• 页码范围: 34-39
• 分类号: Q93
• 字数: 2804字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-6678.2010.04.007

摘要

比较了7 L发酵罐中不同诱导温度对华根霉前导肽脂肪酶在巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)中表达水平和稳定性的影响.通过实验表明在28 ℃条件下,最大酶活可以达到1412.5 U/mL,是30 ℃条件下的2.3倍,25 ℃条件下的1.3倍;而其产率可以达到12811 U/L·h-1,比产率达到82.6 U/gDCW·h-1.同时,在实验过程中发现诱导温度对目的蛋白的降解和聚合有重要的影响.通过对蛋白酶活性的测定和还原SDS-PAGE证实随着诱导温度的提高,蛋白酶活性急剧上升,从而导致由前导肽(37 kD)降解为成熟肽(30 kD)的降解作用的加剧.此现象在30 ℃条件下最为明显,在诱导84 h时前导肽已经全部降解为成熟肽.另外,通过非还原SDS-PAGE和分析表明随着诱导温度的提高也导致了二聚体的含量也逐渐增加.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	喻晓蔚	江南大学教育部工业生物技术重点实验室	24	113	6.0	9.0
2	徐岩		12	323	5.0	12.0
3	王同春	江南大学教育部工业生物技术重点实验室	1	3	1.0	1.0