减蛋综合征病毒五邻体重组蛋白的原核表达及抗原性鉴定

• 作者: 于志丹 王君伟 肖妙 马波
• 来源期刊: 东北农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 减蛋综合征病毒 五邻体 原核表达 抗原性
• 年，卷（期）: 2009,（2）
• 所属期刊栏目: 动物医学
• 页码范围: 83-87
• 页数: 5页
• 分类号: S852.65|Q78
• 字数: 4533字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-9369.2009.02.020

摘要

根据减蛋综合征病毒(EDSV)AV-127株的全基因序列(GenBank序列号AC000004)设计了1对引物,采用PCR扩增出五邻体(Penton)完整基因,将其连接到克隆裁体pMD18-T,经过鉴定后测序.序列分析表明,所获得的DNA片段核苷酸序列和GenBank中AV-127株的五邻体比较有9个碱基突变,但利用DNAstar分析,两者的氨基酸完全一致.然后酶切胶回收后将目的片段连接到质粒表达载体pET-30a(+),获得的阳性克隆命名为pET-30a-Penton.将pET-30a-Penton转化E coli Rosetta,经37℃、1.0 mmol·L-1IPTG诱导表达5 h,SDS-PAGE分析超声裂解后的上清和沉淀,结果显示目的蛋白以包涵体形式存在,蛋白分子质量约为54.0 ku.Western Blot试验结果表明目的蛋白具有较好的抗原活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	马波	东北农业大学动物医学学院	71	491	14.0	18.0
2	王君伟	东北农业大学动物医学学院	214	1491	20.0	26.0
3	于志丹	东北农业大学动物医学学院	7	30	3.0	5.0
4	肖妙	东北农业大学动物医学学院	1	11	1.0	1.0