编码小鼠PGC1α基因的重组腺病毒载体构建及鉴定

• 作者: 李卫平 李启富 程庆丰 钟立 青华 马仕坤
• 来源期刊: 重庆医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: PGC1α 腺病毒载体 同源重组
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 6-8
• 页数: 3页
• 分类号: R589.2
• 字数: 2941字
• 语种: 中文

摘要

目的:构建编码小鼠PGC1α基因的重组腺病毒载体.为进一步研究其蛋白功能提供工具.方法:穿梭质粒pAdTrack-CMV-PGC1α线性化后与骨架质粒pAdeasy-1在BJ5183菌中完成同源重组,筛选并提取重组正确的腺病毒质粒,PacI线性化,脂质体转染293细胞包装出成熟的具有感染活力的腺病毒颗粒,TCID50法测定病毒滴度,Western bloting检测PGC1α蛋白在293细胞的表达.结果:测序及酶切鉴定表明目的基因正确插人穿梭质粒,读码框未发生移位.重组腺病毒扩增后滴度约3×1010TCID50/ml,能在293细胞中表达PGC1α蛋白.结论:利用细菌内同源重组的方法成功构建了编码小鼠PGC1α基因的重组腺病毒载体,并观察到其蛋白表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	程庆丰	重庆医科大学附属第一医院内分泌科	98	297	10.0	13.0
2	青华	重庆医科大学附属第一医院内分泌科	27	126	7.0	10.0
3	李启富	重庆医科大学附属第一医院内分泌科	230	1066	16.0	22.0
4	李卫平	重庆医科大学附属第一医院内分泌科	11	59	4.0	7.0
5	马仕坤	重庆医科大学附属第一医院内分泌科	9	29	3.0	5.0
6	钟立	重庆医科大学附属第一医院内分泌科	25	78	5.0	7.0