靶向survivin基因的shRNA质粒表达载体的构建

• 作者: 熊英 郭文
• 来源期刊: 实用医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: RNA干扰 质粒 Sunrivin shRNA
• 年，卷（期）: 2009,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 527-529
• 页数: 3页
• 分类号: R3
• 字数: 3873字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-5725.2009.04.009

摘要

目的:利用pGenesil-1质粒构建靶向sunrivin基因的2个短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)表达载体.方法:设计2对shRNA,GC比在40%-55%之间,进而应用BLAST软件进行同源性剔除,保证所得shRNA序列靶向survivin基因,分别克隆至带有U6启动子的质粒pGenesil-1中,构建质粒表达载体,转化大肠杆菌DH5α菌株扩增.提取质粒,酶切鉴定后测序分析.双酶切重组质粒进行酶切鉴定.结果:成功构建靶向survivin基因的2个shRNA质粒表达载体.经双酶切鉴定及质粒测序结果完全符合设计要求.结论:经鉴定设计的2条shRNA已成功连接于质粒上,可以应用于进一步RNA干扰试验.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郭文	南方医科大学南方医院消化病研究所	35	169	9.0	11.0
2	熊英	中国人民解放军第252医院消化科	28	168	9.0	12.0