鸭β-防御素2基因的克隆、表达和表达产物的生物学特性分析

• 作者: 刘胜旺 廖文艳 王瑞琴 韩宗玺 马得莹
• 来源期刊: 中国农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 鸭 AvBD2 遗传进化 重组蛋白 抗菌活性
• 年，卷（期）: 2009,（10）
• 所属期刊栏目: 兽医
• 页码范围: 3685-3692
• 页数: 8页
• 分类号: S8
• 语种: 中文
• DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2009.10.0038

摘要

[目的] 从鸭组织中克隆鸭β-防御素(AvBD)2基因,在大肠杆菌中高效表达,检测重组鸭AvBD2蛋白的生物学特性.[方法] 应用RT-PCR技术从鸭胰腺组织中扩增鸭AvBD2基因,根据已发现的禽β-防御素和部分哺乳类动物β-防御素-2的氨基酸序列构建系统进化树,将该基因克隆到大肠杆菌原核表达载体pGEX-6p-1上进行原核表达,对该重组蛋白进行纯化,测定体外抗菌活性与理化特性.[结果] 鸭胰腺组织中克隆出鸭AvBD2基因的cDNA大小为195 bp,编码64个氨基酸.同源性分析表明,鸭AvBD2与其它物种AvBD2同源性较高.凝胶电泳结果显示重组鸭AvBD2蛋白在原核高效表达(分子量约为32 kD),对多杀性巴氏杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽胞杆菌有较高抗菌活性,对大肠杆菌与猪霍乱沙门氏菌的抗菌活性较弱.重组鸭AvBD2蛋白对上述细菌的最小抑菌浓度为15.25～125 μg·ml-1,对猪霍乱沙门氏菌最小抑菌浓度大于400 μg·ml-1.重组鸭AvBD2蛋白在-20-100℃或pH 3-12条件下处理30 min后仍有抗金黄色葡萄球菌作用.[结论] 克隆并表达了鸭AvBD2基因,表达产物具有抗菌活性,对温度和酸碱度有较高的稳定性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王瑞琴	东北农业大学动物营养研究所	2	25	2.0	2.0
3	马得莹	东北农业大学动物营养研究所	40	967	20.0	30.0
4	刘胜旺		53	724	15.0	25.0
5	韩宗玺	中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室	9	129	8.0	9.0
6	廖文艳	东北农业大学动物营养研究所	3	76	3.0	3.0