人bFGF基因克隆表达及表达产物的纯化和生物学活性分析

• 作者: 张娅捷 张金三 李永勇 林剑 王莉馨 范洪学
• 来源期刊: 白求恩医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 人碱性成纤维细胞生长因子 高效表达 纯化
• 年，卷（期）: 1999,（1）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 11-13
• 页数: 3页
• 分类号: R392.2
• 字数: 2199字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-587X.1999.01.004

摘要

目的:通过融合蛋白表达方式将编码人碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)cDNA在大肠杆菌DH5α中的表达,为bFGF进一步研究提供材料来源.方法:用多聚酶链反应(PCR)及DNA重组技术将PCR产物克隆到pGEM-5Z载体并测序,然后克隆到表达载体pXH上.结果:转化重组质粒pLX1的大肠杆菌经42℃温控诱导4～5 h,SDS-PAGE分析显示融合蛋白的分子量约35 000,薄层扫描分析表明该蛋白占菌体总蛋白量的9.9%.经Factor Xa酶切后得到分子量约为17 000的bFGF,其生物学活性ED50为2.29 ng/ml.结论:经PCR方法扩增的bFGF可在大肠杆菌中高效表达,为其进一步结构与功能研究打下基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	范洪学	白求恩医大预防医学院毒理教研室	5	27	3.0	5.0
2	林剑	暨南大学生物工程研究所	49	553	13.0	21.0
3	王莉馨	白求恩医大预防医学院毒理教研室	1	4	1.0	1.0
4	李永勇	白求恩医大一院检验科	1	4	1.0	1.0
5	张娅捷	白求恩医大预防医学院毒理教研室	1	4	1.0	1.0
6	张金三	中国医科院医学分子生物学国家重点实验室	1	4	1.0	1.0