Survivin启动子介导自杀基因与突变体融合基因真核表达载体的构建

• 作者: 乔敏敏 吴云林 孙萍胡 朱黎明 涂水平 董文杰
• 来源期刊: 世界华人消化杂志
• 学科: 医学
• 关键词: Survivin启动子 Survivin突变体 胞嘧啶脱氨酶基因 载体构建
• 年，卷（期）: 2009,（11）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1085-1090
• 页数: 6页
• 分类号: R3
• 字数: 4477字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-3079.2009.11.005

摘要

目的:构建Survivin启动子介导自杀基因胞嘧啶脱氨酶(CD)与Survivin Cys84Ala突变体(SurMut)融合基因的重组腺相关病毒质粒(pAM/SurP-CDglySurMut),探讨其在肿瘤细胞中有效表达融合基因的能力.方法:PCR扩增E.coli CD基因和带有甘氨酸(gly)连接体的Survivin突变体片段,亚克隆至具有Survivin启动子的腺相关病毒载体pAM/SurP,获得重组表达载体pAM/SurP-CDglySurMut.重组载体瞬时转染胃癌细胞,Western blot检测融合蛋白的表达.结果:经PCR扩增成功克隆E.coli CD基因和带有gly连接体的Survivin突变体片段.重组阳性克隆经限制性酶切鉴定和基因测序,证实目的基因CDglySurMut已正确插入pAM/SurP载体中.Western blot证实Survivin启动子能够驱动CDglySurMut融合基因在胃癌细胞中达.结论:pAM/SurP-CDglySurMut载体能够在肿瘤细胞中表达融合蛋白,为进一步探讨其靶向治疗肿瘤奠定了实验基础

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴云林	上海交通大学附属瑞金医院消化科	193	846	14.0	20.0
2	涂水平	上海交通大学附属瑞金医院消化科	19	96	6.0	8.0
3	孙萍胡	上海交通大学附属瑞金医院消化科	14	83	6.0	8.0
4	朱黎明	上海交通大学附属瑞金医院消化科	23	85	5.0	7.0
5	乔敏敏	上海交通大学附属瑞金医院消化科	34	177	7.0	11.0
6	董文杰	上海交通大学附属瑞金医院消化科	12	55	5.0	7.0