HIV-1整合酶基因合成与其在大肠杆菌中的高效表达

• 作者: 何小维 刘晓云 彭运平 李文美 杨连生 王继华 赵喜红
• 来源期刊: 现代生物医学进展
• 学科: 生物学
• 关键词: 人类免疫性缺陷病毒 聚合酶 基因合成 高效表达
• 年，卷（期）: 2009,（21）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 4024-4026
• 页数: 3页
• 分类号: Q75|Q786
• 语种: 中文

摘要

目的:通过人工合成HIV-1整合酶(integrase,IN)基因的编码序列,提高目的蛋白的表达.方法:根据IN的氨基酸序列,选择大肠杆菌偏好的密码子,设计并合成了877碱基,共编码288个氨基酸,克隆入pMD18-T载体,经测序证实后,构建原核表达载体pET-His-p31,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达后,进行SDS-PAGE和Western blot分析.结果:酶切及测序结果表明表达载体构建成功,工程菌诱导表达后的电泳图谱在相对分子质量为32kDa的位置出现明显目的蛋白条带,表达产物主要以包涵体形式存在,占菌体总蛋白的65.9%,Western blot结果表明表达的聚合酶蛋白能与HIV-1阳性血清发生特异性反应.结论:已获得高效表达工程菌pET-His-p31,为下一步研究HIV诊断试剂奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨连生	华南理工大学轻工与食品学院	195	2967	28.0	42.0
2	何小维	华南理工大学轻工与食品学院	122	1255	20.0	30.0
3	刘晓云	华南理工大学轻工与食品学院	5	32	1.0	5.0
4	彭运平		11	61	3.0	7.0
5	王继华		26	72	5.0	6.0
6	赵喜红	华南理工大学轻工与食品学院	11	212	7.0	11.0
7	李文美	华南理工大学轻工与食品学院	9	12	2.0	3.0