小鼠激活素受体相互作用蛋白2的原核表达及抗血清制备

• 作者: 陈希曙
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 小鼠ARIP2 原核表达 蛋白纯化 抗血清
• 年，卷（期）: 2009,（12）
• 所属期刊栏目: 农业生物技术
• 页码范围: 5398-5399,5584
• 页数: 3页
• 分类号: Q786
• 字数: 2423字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2009.12.030

摘要

[目的]克隆小鼠激活素受体相互作用蛋白2(ARIP2)cDNA序列,利用大肠杆菌表达ARIP2,制备兔抗小鼠ARIP2的多克隆抗血清.[方法]采用RT-PCR方法,将小鼠ARIP2基因克隆到pET-32a(+)质粒,构建ARIP2原核表达载体并转化到大肠杆菌,IPTG诱导融合蛋白的表达,经亲和层析纯化获得可溶性重组蛋白,免疫家兔后制备ARIP2抗血清,分别采用ELISA,Western blot检测抗体效价和特异性.[结果]测序结果表明重组质粒pET32a(+)-ARIP2构建成功;SDS-PAGE分析表明获得的重组蛋白为可溶蛋白;经过亲和层析后得到有效分离;Elisa法测定的抗血清效价为1∶50 000;Western blot鉴定结果表明抗血清能与目的蛋白特异性结合.[结论]成功将ARIP2进行了原核表达并制备了高效价、高特异性的兔抗小鼠ARIP2抗血清,为进一步研究ARIP2功能提供了有力工具.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈希曙	中国科学院北京基因组研究所	1	0	0.0	0.0