大肠杆菌O157∶H7单克隆抗体胶体金免疫层析检测试纸条的研制

• 作者: 何孔旺 夏兴霞 孟祥升 张雪寒 朱国强 王永山
• 来源期刊: 中国动物传染病学报
• 学科: 农学
• 关键词: 大肠杆菌O157∶H7 单克隆抗体 胶体金 免疫层析试纸条 人兽共患病
• 年，卷（期）: 2010,（4）
• 页码范围: 47-53
• 分类号: S852.612
• 字数: 5400字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-6422.2010.04.009

摘要

用E.coli O157∶H7菌体免疫BALB/c鼠,制备免疫脾细胞,与SP2/0骨髓瘤细胞融合,获得了16株分泌单克隆抗体(mAb)的杂交瘤细胞株.其中,1D3、2E7和2H7三株为O157∶H7特异单克隆抗体,Ig亚类分别为IgMκ、IgG2bκ和IgG2bκ,腹水抗体ELISA效价分别为103、105和106.用纯化的单克隆抗体2E7标记胶体金,制备金标抗体玻璃纤维素膜;将纯化的2H7和羊抗鼠IgG分别作为检测和对照捕捉抗体包被于硝酸纤维素膜(NC)上;组装成双抗夹心法O157∶H7胶体金免疫层析检测试纸条.用该试纸条可特异检测O157∶H7,敏感度为106 CFU/mL,与相同单克隆抗体2H7和2E7建立的O157∶H7夹心ELISA检测方法的敏感度相当,试纸条简便快速,在1～5 min内可得出检测结果,便于O157∶H7的临床快速诊断与现场检测样品的快速筛查.