重组丙型肝炎病毒核心蛋白的原核表达、纯化和抗体制备

• 作者: 安静 王娟 范东瀛 郑群 陈辉 高娜
• 来源期刊: 微生物与感染
• 学科: 医学
• 关键词: 丙型肝炎病毒 核心蛋白 原核表达 抗体制备
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 页码范围: 140-145
• 分类号: R5
• 字数: 4661字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-6184.2010.03.003

摘要

本文旨在获得纯化丙型肝炎病毒(HCV)核心蛋白(HCV-C)及抗HCV-C多克隆抗体,为深入研究HCV-C与肝细胞相互作用的分子机制奠定基础.首先以HCV1b亚型HC-J4-91全基因组质粒为模板,聚合酶链反应(PCR)扩增HCV-C基因,构建重组质粒pQE31-HCV-C.融合蛋白经原核表达、纯化后,免疫BALB/c小鼠,制备抗HCV-C多克隆抗体.利用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测抗体效价,蛋白免疫印迹(Western blot)和间接免疫荧光染色鉴定抗体特异性.结果显示,表达HCV-C的原核表达质粒pQE31-HCV-C构建正确,获得相对分子质量约22000的纯化融合蛋白.ELISA检测重组蛋白免疫小鼠的抗血清效价达1∶12800.结果显示,自制的抗HCV-C多克隆抗体能特异性识别HCV-C.本研究获得了纯度较好、原核表达的HCV-C,并成功制备了抗HCV-C多克隆抗体,为深入研究HCV-C的致病机制提供了有实用价值的研究工具.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王娟	首都医科大学基础医学院微生物学教研室	80	431	11.0	18.0
2	高娜	首都医科大学基础医学院微生物学教研室	25	89	6.0	8.0
3	安静	首都医科大学基础医学院微生物学教研室	41	142	7.0	10.0
4	陈辉	首都医科大学基础医学院微生物学教研室	54	241	9.0	13.0
5	范东瀛	首都医科大学基础医学院微生物学教研室	19	25	3.0	3.0
6	郑群	首都医科大学基础医学院微生物学教研室	30	143	7.0	11.0