打靶载体PIJ792的构建

• 作者: 张南燕 林玉双 樊伟明 洪文荣
• 来源期刊: 海峡药学
• 学科: 医学
• 关键词: 基因打靶 金色链霉菌 氯霉素抗性基因
• 年，卷（期）: 2010,（4）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 164-166
• 分类号: R97
• 字数: 1837字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-3765.2010.04.093

摘要

目的 利用pIJ790,pIJ773和pUC19等基本质粒,构建金色链霉茵基因打靶筛选体系所需质粒pIJ792.方法 以质粒pIJ790为模板,将PCR扩增的cat基因片段插入到pMD19-T的多克隆位点,得重组质粒pFD31.EcoR Ⅰ和Hind Ⅲ双酶切pIJ773,其小片段与pUC19经同样双酶切后的片段酶连克隆,得新质粒pFD32.pFD31和pFD32再分剐经Sac Ⅰ酶切,将pFD31含Cat的小片段和pFD32的大片段酶连克隆,筛选得重组质粒pFD33,EcoR Ⅰ与Hind Ⅲ酶切,将切下的两个小片段与pIJ773经同样双酶切后的大片段进行酶连克隆,最终得筛选质粒pIJ792.结果 新质拉pIJ792的抗氯霉素能力超过150λg·mL-1.结论 pIJ792可满足金色链霉菌基因打靶的筛选需要,实现了用于金色链霉菌PCR基因打靶所需筛选体系的构建.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	樊伟明		14	45	5.0	5.0
2	洪文荣	福州大学生物科学与工程学院	53	194	8.0	11.0
3	林玉双	福州大学生物科学与工程学院	4	8	2.0	2.0
4	张南燕	福州大学生物科学与工程学院	1	3	1.0	1.0