大鼠gremlin1真核表达载体的构建及表达

• 作者: 刘艳玲 吴江锋 张贺吉 柳长柏
• 来源期刊: 生物技术通报
• 学科: 医学
• 关键词: Gremlin1 肝纤维化 真核表达
• 年，卷（期）: 2010,（9）
• 页码范围: 169-172
• 分类号: R3
• 字数: 2707字
• 语种: 中文

摘要

构建大鼠gremlin1的真核表达载体pcDNA-gremlin,并观察其在真核细胞中的表达.从大鼠脑组织中提取mRNA通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及巢式聚合酶链反应(nest-PCR)获得编码gremlin1的cDNA,定向克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+)中;经酶切和测序鉴定构建正确,应用脂质体法转染HSC-T6细胞,并通过蛋白免疫印迹法检测细胞内gremlin1的表达.结果显示,构建了大鼠gremlin1的真核表达载体,转染HSC-T6细胞培养48 h后,收集并裂解转染细胞,蛋白免疫印迹法检测到转染HSC-T6细胞内gremlin1的表达显著增高.成功构建了真核表达载体pcDNA-gremlin,为研究gremlin在大鼠肝纤维化发生发展过程中的作用及作用机制奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张贺吉	三峡大学分子生物学研究所	7	11	2.0	3.0
2	柳长柏	三峡大学分子生物学研究所	56	96	5.0	7.0
3	吴江锋	三峡大学分子生物学研究所	43	151	7.0	10.0
7	刘艳玲	三峡大学分子生物学研究所	2	2	1.0	1.0