猪瘟兔化弱毒疫苗株TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法的建立及初步应用

• 作者: 刘大伟 尹秀凤 张小飞 李郁 毛火云 胡来根
• 来源期刊: 中国预防兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪瘟兔化弱毒疫苗 荧光定量RT-PCR 检测 初步应用
• 年，卷（期）: 2010,（6）
• 所属期刊栏目: 诊断和检测技术
• 页码范围: 446-450
• 分类号: S852.5
• 字数: 3680字
• 语种: 中文

摘要

为建立一种快速鉴定猪瘟兔化弱毒疫苗株(HCLV)的方法,本研究根据GenBank中登录的HCLV株基因组序列,在Ems基因序列区内设计一对引物和一条TaqMan探针,建立了检测HCLV的荧光定量RT-PCR(FQRT-PCR)方法.该方法检测的灵敏度可达3.84拷贝/μL;而对猪细小病毒、猪伪狂犬病毒、猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒、牛病毒性腹泻病毒基因组扩增结果均为阴性.实验组批内变异系数为1.05%～1.84%,批间变异系数为3.70%～5.43%.通过对32批HCLV半成品抗原和9批成品疫苗,分别用经典的兔检法测定兔体感染量(RID)和新建立的FQ RT-PCR方法进行检测比较,两者有较好的相关性.结果表明,该方法具有快速、敏感、特异性强、稳定性好等优点,对HCLV生产配制及成品检验具有指导作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李郁	安徽农业大学动物科技学院	140	887	14.0	23.0
2	张小飞	江苏省农业科学院兽医研究所	29	145	7.0	11.0
6	胡来根	江苏省农业科学院兽医研究所	8	201	6.0	8.0
10	尹秀凤		30	141	7.0	10.0
11	刘大伟	安徽农业大学动物科技学院	2	12	2.0	2.0