无POU域八聚体结合蛋白基因的克隆及其在Hepa 1-6细胞内的表达

• 作者: 姜勇 张秀娟 王娟 邓鹏
• 来源期刊: 中国现代医药杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 无POU域八聚体结合蛋白 蛋白表达 蛋白定位
• 年，卷（期）: 2010,（7）
• 页码范围: 1-4
• 分类号: R3
• 字数: 2508字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-9463.2010.07.001

摘要

目的 构建小鼠无POU域八聚体结合蛋白(non-POU-domain-containing,octamer binding protein,NonO)真核表达载体并在小鼠Hepa 1-6肝癌细胞内表达,观察NonO胞内表达、定位及脂多糖(LPS)对其定位的影响.方法 提取小鼠肝组织总RNA,RT-PCR扩增小鼠NonO基因的蛋白编码序列.采用基因重组技术将其亚克隆至pcDNA3-HA真核表达载体中,将该载体瞬时转染Hepa 1-6细胞,通过细胞免疫荧光方法观察NonO的胞内表达及LPS对其定位的影响.结果 酶切和DNA测序证明所构建质粒正确;细胞免疫荧光可见NonO在Hepa 1-6细胞内表达、分布于细胞核,LPS刺激后NonO分布无明显变化.结论 成功构建NonO真核表达载体,为研究NonO在基因表达调控中作用及其生物功能提供了重要载体.进一步证实NonO为定位于细胞核的核蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王娟	南方医科大学广东省功能蛋白质组学重点实验室	28	123	6.0	10.0
2	张秀娟	广东医学院生理学教研室	10	34	3.0	5.0
3	姜勇	南方医科大学广东省功能蛋白质组学重点实验室	72	377	8.0	17.0
4	邓鹏	南方医科大学广东省功能蛋白质组学重点实验室	19	65	5.0	7.0