重组腺病毒携带的人GHS-R1a基因在人胚肾293细胞中的表达

• 作者: 刘丽 姜宏 宋宁 徐华敏 王俊 谢俊霞
• 来源期刊: 神经科学通报（英文版）
• 关键词: 腺病毒载体 同源重组 生长激素促分泌素受体1a亚型
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 页码范围: 225-231
• 页数: 7页
• 语种: 英文
• DOI: 10.1007/s12264-010-1228-1

摘要

目的 构建携带GHS-R1a基因的重组腺病毒,为转基因做准备.方法 采用PCR法扩增GHS-R1a基因片段,随后亚克隆至腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV,形成重组质粒pAdTrack-CMV-GHS-R1a.线性化的pAdTrackCMV-GHS-R1a和腺病毒骨架质粒pAdEasy1在感受态大肠杆菌BJ5183内同源重组.将线性化重组质粒pAdGHS-R1a 转染进HEK293细胞,并用激光共聚焦显微镜、RT-PCR和Westernblot技术检测绿色荧光蛋白及GHS-R1a的表达.结果 重组质粒pAdGHS-R1a经PacⅠ酶切后得到一个大于30 kb的大片段和一个4.5 kb的小片段,证明重组腺病毒质粒pAdGHS-R1a构建成功.Ad-GHS-R1a转染293细胞后24h能观察到绿色荧光蛋白的表达.RT-PCR和Westemblot均证实GHS-R1a基因能在293细胞中有效表达.结论 携带GHS-R1a基因的重组腺病毒构建成功,为进一步研究GHS-R1a的功能提供了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	姜宏		69	222	8.0	14.0
2	王俊		42	219	9.0	14.0
3	宋宁		22	45	3.0	6.0
4	谢俊霞		91	357	12.0	17.0
5	刘丽		16	89	5.0	9.0
6	徐华敏		8	0	0.0	0.0