检测外周血MUC1蛋白双抗体夹心ELISA方法的建立及初步应用

• 作者: 台桂香 张庆勇 方芳 柳忠辉 窦蕊 赵小霞 陈文博 马吉春
• 来源期刊: 免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: MUC1 抗MUC1多克隆抗体 双抗体夹心ELISA 腺癌诊断
• 年，卷（期）: 2010,（1）
• 所属期刊栏目: 临床免疫学
• 页码范围: 49-52,55
• 页数: 5页
• 分类号: R392.1
• 语种: 中文

摘要

目的 为提高外周血MUC1蛋白检测的敏感度,建立了抗MUC1多克隆抗体的夹心ELISA试剂盒,并对其进行了初步测试.方法 首先成功构建-表达并纯化了MUC1-GST和MUC1-MBP融和蛋白;通过免疫家兔和大鼠,获得抗MUC1血清,经饱和硫酸铵沉淀、Protein A/G纯化及抗GST和MBP抗体吸收的进一步纯化获得纯的家兔抗人及大鼠抗人MUC1多克隆抗体;通过凝血酶溶解MUC1-GST获得MUCI标准品.经不同的筛选确立了以家兔抗人MUC1抗体作为包被抗体、大鼠抗MUC1抗体作为检测抗体的双抗体夹心试剂盒,敏感度可达到0.2 ng/ml.结果 对32例乳腺癌患者和20例健康受试者外周血血清中MUCl蛋白水平的检测结果显示,乳腺癌患者的阳性检出率达到53.1%(17例,32例),而健康对照组检出率为0.结论 本研究建立的抗MUC1多克隆抗体双夹心试剂盒有望应用于临床诊断.