豆豉纤溶酶基因在大肠杆菌中的可溶性表达及纯化

• 作者: 张少平 郭勇 陈亮
• 来源期刊: 生命科学研究
• 学科: 生物学
• 关键词: 豆豉纤溶酶 可溶性表达 纯化 大肠杆菌
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 208-212
• 分类号: Q786
• 字数: 505字
• 语种: 中文

摘要

豆豉纤溶酶是从豆豉中发现的新型纤溶酶.从枯草杆菌DC-12中提取总DNA,PCR法扩增pro-DFE基因.将Pro-DFE基因插入载体pET-32a,构建表达质粒pET-pro-DFE,转化大肠杆菌BL21(DE3),对重组菌株进行变温诱导表达,重组菌株于37 ℃培养至OD600为0.6时,加入终浓度为0.4 mmol/L的IPTG于24 ℃进行诱导,SDS-PAGE显示可溶性重组融合蛋白约占重组蛋白的60%.且少量融合重组蛋白发生自切割,形成成熟的豆豉纤溶酶,破菌上清中含有成熟的豆豉溶栓酶,纤溶活性为200 IU/mL.重组酶经纯化后比酶活为1 280 IU/mg.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郭勇	华南理工大学生物科学与工程学院	195	2299	24.0	36.0
2	陈亮	华南理工大学生物科学与工程学院	43	242	10.0	13.0
3	张少平	华南理工大学生物科学与工程学院	3	12	2.0	3.0