HPV 16L1基因的原核表达及表达条件的优化

• 作者: 姜海蓉 彭方亮 彭方毅 林治华 赵卫兵 陈保德 陈盛珍 陈远翔
• 来源期刊: 浙江大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 病毒蛋白质类/生物合成 病毒蛋白质类/遗传学 大肠杆菌/遗传学 基因表达 克隆,分子 乳头状瘤病毒,人/遗传学 HPV16L1 原核表达 GST 融合蛋白 疫苗
• 年，卷（期）: 2010,（4）
• 页码范围: 395-398,418
• 分类号: R739.6
• 字数: 2876字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3785/j.issn.1008-9292.2010.04.010

摘要

目的:构建HPV 16L1基因的原核表达质粒,并优化其表达条件.方法:根据GeneBank中的HPV序列及pGEX-KG中的多克隆位点设计引物,以含有HPV全长基因片段重组质粒为模板,经PCR扩增出1 500 bp 的DNA片段.将所得片段与pGEX-KG 载体连接,转化JM109大肠杆菌,筛选阳性克隆.其扩增片段测序结果与原序列一致,表明原核表达载体pGEX-KG-HPV16L1已构建成功.提取pGEX-KG-HPV16L1质粒转化到BL21(DE3)表达菌株中,经IPTG 诱导后收集菌体,进行SDS-PAGE,Western Blot鉴定.结果:在大肠杆菌中获得HPV16L1基因融合表达,融合蛋白的相对分子量为83kDa;表达的蛋白能与抗HPV 16L1抗体发生特异性反应.结论:HPV 16L1基因在大肠杆菌中获得高效表达,为HPV16L1疫苗的研制奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	林治华	重庆理工大学药学与生物工程学院	45	155	5.0	11.0
2	彭方毅	重庆理工大学药学与生物工程学院	23	98	6.0	9.0
3	姜海蓉	重庆理工大学药学与生物工程学院	22	126	6.0	10.0
4	彭方亮	重庆市第四人民医院妇产科	9	38	4.0	6.0
5	赵卫兵	重庆市第四人民医院麻醉科	9	38	4.0	6.0
6	陈远翔	重庆理工大学药学与生物工程学院	4	15	2.0	3.0
7	陈盛珍	重庆理工大学药学与生物工程学院	4	16	2.0	4.0