shRNA慢病毒抑制BGC823细胞株GnT-V表达的载体构建

• 作者: 吴琼 孙龙娥 张俊杰 操龙洋 欧宏亮 王志荣
• 来源期刊: 同济大学学报(医学版)
• 学科: 医学
• 关键词: N-乙酰氨基葡萄糖转移酶V RNA干扰 慢病毒
• 年，卷（期）: 2010,（6）
• 页码范围: 5-10
• 分类号: R57
• 字数: 4167字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn1008-0392.2010.06.002

摘要

目的 构建针对N-乙酰氨基葡萄糖转移酶V(GnrV)基因的 shRNA(short harpin RNA,siRNA前体)表达栽体,鉴定GnT-V基因干扰效率.方法 体外设计并合成针对GnT-V基因的慢病毒shRNA干扰载体,通过PCR及测序证实载体构建成功.将慢病毒颗粒以最适滴度转染人低分化胃癌细胞株BGC823,应用Real-Time PCR、Western blotting检测GnT-V抑制效率.结果 构建的慢病毒载体的序列通过PCR、测序等鉴定证实与设计序列相同;Real-Time PCR检测显示干扰组BGC823细胞GnT-V mRNA表达率下降88.04%,Western blotting显示干扰组BGC823细胞表达GnT-V蛋白量较空白载体对照组明显减少.结论 构建的shRNA表达载体可在mRNA和蛋白水平上有效抑制BGC23细胞株GnT-V基因的表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王志荣	同济大学附属同济医院消化内科	54	395	11.0	17.0
2	操龙洋	同济大学附属同济医院消化内科	2	6	1.0	2.0
3	吴琼	同济大学附属同济医院消化内科	19	131	6.0	11.0
4	张俊杰	同济大学附属同济医院消化内科	21	224	8.0	14.0
5	孙龙娥	同济大学附属同济医院消化内科	5	15	3.0	3.0
6	欧宏亮	同济大学附属同济医院消化内科	3	5	1.0	2.0