基因宏阵列和荧光定量PCR方法对西瓜枯萎病害土壤中尖孢镰刀菌的快速检测和定量

• 作者: 凌宁 徐大兵 朗娇娇 沈其荣 罗佳 胡江 赵爽
• 来源期刊: 土壤学报
• 学科: 农学
• 关键词: 尖孢镰刀菌 基因宏阵列 实时荧光定量PCR SYBR Green I
• 年，卷（期）: 2010,（4）
• 页码范围: 703-708
• 分类号: S154.38
• 字数: 4965字
• 语种: 中文

摘要

采用基因宏阵列(Macroarray)和荧光定量PCR(Real-time PCR)的方法,对引起两瓜枯萎病害的病原菌尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)进行了快速监测和快速绝对定量,并且对实验条件进行了优化和摸索.结果显示,在西瓜枯萎病害发病较为严重的处理N-+P-和N-+P+的根际土壤中,Macroarray检测到强烈的阳性信号,表明尖孢镰刀菌的大量存在,同时荧光定量PCR的结果也表明在这两个处理的根际土壤中尖孢镰刀菌数量最多,分别为每g土壤8.89×105和2.24 × 105个拷贝数;而在末发生枯萎病害的处理N++P-和N++P+中,Macroarray末检测到阳性信号,根际土壤中尖孢镰刀菌数量分别为每g土壤6.23×103和3.28×103个拷贝数;而四个处理的土体土壤中尖孢镰刀菌的数量均维持在每g土壤102～103个拷贝数,Macroarray未检测到阳性信号.与传统检测方法如病原菌的分离培养、平板稀释计数等相比,上述分子生物学方法对病原真菌的检测和定量更为准确快速、省时省力.