尖孢镰刀菌TaqMan探针荧光定量PCR快速检测方法的建立及应用

• 作者: 刘先宁 安娜 李君文 汲珊珊 王新为 谌志强 邱志刚 郭长江 金敏 陈照立
• 来源期刊: 现代检验医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: TaqMan探针 荧光定量PCR 尖孢镰刀菌 真菌性角膜炎
• 年，卷（期）: 2012,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 30-33
• 页数: 4页
• 分类号: R378|Q503
• 字数: 4453字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7414.2012.06.010

摘要

目的 建立TaqMan探针荧光定量PCR检测方法,用于临床标本中尖孢镰刀菌的快速诊断.方法针对尖孢镰刀菌的β-tubulin 基因,设计特异性引物和探针并构建该基因的重组质粒标准品;优化PCR反应条件,建立尖孢镰刀菌的荧光定量PCR检测方法;通过10种标准菌株和33株临床分离株的应用检测,验证该方法的可行性.结果 该检测方法具有较好的特异度、敏感度和重复性,6株尖孢镰刀菌均有明显扩增,而其它37株临床常见的致角膜炎真菌标准株或分离株无明显扩增;最低检出限为408 copies/μl,且变异系数低于5%.结论研究成功建立了尖孢镰刀菌的TaqMan探针荧光定量PCR检测方法,对临床上真菌性角膜炎的快速诊断及指导用药具有实际应用性和重要意义.