构建用慢病毒载体介导的RNAi敲除ABCG2的Caco-2细胞模型

• 作者: 张斌 朱泽 李伟霞 李光明 李咏梅 杜文才 程彬
• 来源期刊: 天津医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: ABCG2 Caco-2细胞 慢病毒载体 RNAi
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 页码范围: 370-374
• 分类号: R373
• 字数: 4100字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-8147.2010.03.003

摘要

目的:用重组构建的靶向ABCG2基因的慢病毒载体,感染Caco-2细胞,构建长期稳定敲除ABCG2蛋白的口服药物肠吸收的Caco-2细胞体外模型.方法:采用三质粒系统慢病毒重组技术,针对ABCG2基因的4个靶点,构建4个靶向ABCG2基因的慢病毒和1个不靶向ABCG2基因的对照组慢病毒,感染Caco-2细胞,应用RT-PCR,realtime PCR进行定性和半定量检测ABCG2在细胞中mRNA水平的表达.用Western blotting检测其蛋白水平的表达.结果:慢病毒Lv-ABCG2-sh1、2、3、4感染的细胞组与Lv-Negative-sh对照组相比,ABCG2的mRNA表达量分别下调了11%、77%、2%和65%,蛋白水平的表达也相应地减少,Lv-ABCG2-sh2细胞组具最高敲除效率.结论:用慢病毒载体介导的RNAi成功构建了长期稳定敲除ABCG2的Caco-2细胞模型.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张斌	天津医科大学病原生物学教研室	39	222	7.0	13.0
2	杜文才	天津医科大学病原生物学教研室	4	12	2.0	3.0
3	李咏梅	天津医科大学病原生物学教研室	17	66	5.0	7.0
4	朱泽	天津医科大学病原生物学教研室	21	113	6.0	10.0
5	李伟霞	天津医科大学病原生物学教研室	4	12	2.0	3.0
6	李光明	天津医科大学病原生物学教研室	23	67	4.0	7.0
7	程彬	天津医科大学病原生物学教研室	3	9	2.0	3.0