EB病毒潜伏膜蛋白2A1-119重组质粒的表达及鉴定

• 作者: 夏克栋 张丽芳 张琴 李文姝 薛向阳 陈韶
• 来源期刊: 温州医学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: 疱疹病毒4型,人 潜伏膜蛋白2A pGEX-4T-1 原核表达 重组,遗传
• 年，卷（期）: 2010,（4）
• 页码范围: 319-321
• 分类号: R3
• 字数: 2690字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2138.2010.04.001

摘要

目的:构建含EB病毒(Epstein -Barr virus,EBV)潜伏膜蛋白(LMP)2A N端1-119基因的重组质粒,探讨其在原核表达系统中的表达情况.方法:采用RT-PCR方法从B95-8细胞中获得LMP2A1-119 外显子基因片段,并克隆到pGEX-4T-1原核表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3)后,经IPTG诱导表达融合蛋白, 通过Ni-NTA离子交换柱层析纯化,进一步采用SDS-PAGE和Western blot鉴定.结果:pGEX/LMP2A1-119重组质粒构建成功,并在大肠杆菌中得到表达.SDS -PAGE结果表明表达产物相对分子质量约为50 kD, West-ern blot结果证实其为目的蛋白.结论:EBV LMP2A1-119蛋白可在pGEX-4T-1原核表达系统中表达,为进一步研究其免疫学特性打下了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张丽芳		74	280	10.0	11.0