人FHIT基因实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立

• 作者: 何涛 刘晓燕 崔维佳 段承刚 王丽 陈晞
• 来源期刊: 泸州医学院学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 脆性组氨酸三联体基因 实时荧光定量RT-PCR SYBR Green I
• 年，卷（期）: 2010,（6）
• 页码范围: 595-597
• 分类号: Q31
• 字数: 1939字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2669.2010.06.001

摘要

目的:建立检测人脆性组氨酸三联体(fragile histidine triad,FHIT)基因的荧光定量RT-PCR方法.方法:根据GenBank中人FHIT基因序列,在保守区设计合成一对特异引物,将PCR扩增得到的FHIT基因克隆至PMD18-T载体上,构建的重组质粒标准品倍比稀释后运用SYBR Green I染料法绘制标准曲线,并进行融解曲线分析.结果:FHIT基因的标准品稀释度在1×107～1×103copies/μl范围内具有良好的线性关系,Ct值线性范围为14.28～28.36,相关系数为0.998,融解曲线分析表明,产物为特异的单峰,Tm为92.3±0.1℃.结论:建立了人FHIT基因实时荧光定量RT-PCR方法,为在mRNA水平对人FHIT的定量分析奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王丽	泸州医学院医学分子生物学实验室	79	179	7.0	8.0
2	何涛	泸州医学院医学分子生物学实验室	112	491	13.0	18.0
3	段承刚	泸州医学院医学分子生物学实验室	57	224	7.0	13.0
4	刘晓燕	泸州医学院医学分子生物学实验室	85	249	8.0	12.0
5	崔维佳	泸州医学院医学分子生物学实验室	3	9	1.0	3.0
6	陈晞		1	0	0.0	0.0