Ea3-1E与mChIL-15融合基因的构建及其真核表达质粒的免疫效果

• 作者: 唐丽 李广兴 杨静红 潘龙 马德星
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 堆形艾美球虫 融合基因 真核表达质粒 免疫效果
• 年，卷（期）: 2010,（9）
• 页码范围: 913-919
• 页数: 7页
• 分类号: S852.723
• 语种: 中文

摘要

应用重叠扩增PCR技术将鸡堆形艾美球虫子孢子表面抗原3-1E基因片段(Ea3-1E)与编码鸡白细胞介素15成熟蛋白基因片段(mChIL-15)进行串联连接,并在这2个基因片段之间引入4个柔性连接肽SPGS,获得融合基因Ea3-1E-linker-mChIL-15.以pcDNA3.1(+)为载体构建并鉴定真核表达质粒pcD-NA3.1-Ea3-1E-linker-mChIL-15.应用磷酸钙法将质粒体外转染293T细胞,通过间接免疫荧光技术和免疫组织化学技术对重组质粒的体外瞬时表达进行检测.将重组质粒pcDNA3.1-Ea3-1 E-linker-mChIL-15、pcDNA3.1-Ea3-1E和pcDNA3.1分别于14和21日龄经腿部肌肉注射免疫SPF雏鸡,28日龄时,除非免疫非感染组外,各组感染5×104个堆形艾美球虫孢子化卵囊,观察真核表达质粒的免疫保护效果.结果显示,成功构建了融合基因3-1E-linker-mChIL-15,转染后第30小时可检测到融合基因编码蛋白在293T细胞中的瞬时表达.与质粒pcDNA3.1-Ea3-1E相比,质粒pcDNA3.1-Ea3-1E-linker-mChIL-15二次免疫后可提供明显的抗球虫免疫保护效果,提高相对增重率(96.48%),降低卵囊排出率(68.35%),降低十二指肠病变记分等.抗球虫指数为183.78.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李广兴		93	553	14.0	20.0
2	唐丽		3	7	1.0	2.0
3	马德星		30	75	5.0	7.0
4	潘龙		12	45	5.0	6.0
5	杨静红		6	7	2.0	2.0