人Argonaute2蛋白多克隆抗体制备及初步应用

• 作者: 强冉 李海芳 汤华 汤石明 浦永
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: Argonaute2蛋白 多克隆抗体 RNA干扰 RNA诱导沉默复合体
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 所属期刊栏目: 免疫学技术与方法
• 页码范围: 241-244,249
• 页数: 5页
• 分类号: Q78
• 字数: 4430字
• 语种: 中文

摘要

目的:制备人Argonaute2(Ago2)的多克隆抗体,鉴定其特异性,并应用该抗体检测Ago2在人各细胞系中的表达差异及细胞定位.方法:用DNAstar软件寻找抗原性高的Ago2序列区域(命名为k-Ago2),构建k-Ago2的表达质粒,转化大肠杆菌并诱导表达.融合蛋白经切胶回收纯化后免疫大白兔制备抗体.以ELISA检测抗体效价,Western blot鉴定抗体特异性及检测Ago2在细胞系中的表达差异,免疫荧光染色观察Ago2的细胞定位.结果:成功构建表达质粒,继而k-Ago2得以表达与纯化,免疫大白兔后得到Ago2多克隆抗体.ELISA检测抗体效价为1∶19 000,Western blot确定抗体具有高度特异性,并成功地用该抗体检测到Ago2在人各细胞系中的表达差异及细胞定位.结论:Ago2多克隆抗体的成功制备,对RNAi机制的深入研究及其进一步的临床应用均具有重要价值.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	汤华	天津医科大学基础医学院天津市生命科学中心实验室	69	351	10.0	15.0
2	浦永	天津医科大学基础医学院天津市生命科学中心实验室	4	3	1.0	1.0
3	李海芳	天津医科大学基础医学院天津市生命科学中心实验室	1	2	1.0	1.0
4	汤石明	天津医科大学基础医学院天津市生命科学中心实验室	2	2	1.0	1.0
5	强冉	天津医科大学基础医学院天津市生命科学中心实验室	3	22	2.0	3.0