人oGPCRs与Gi1α的基因融合及其在昆虫细胞Sf9 的表达

• 作者: 刘永学 彭明丽 王琼 韩春光 高志清 高月
• 来源期刊: 军事医学科学院院刊
• 学科: 生物学
• 关键词: 孤儿G蛋白偶联受体 G蛋白α亚基 融合蛋白 质粒 杆状病毒 表达系统 转染
• 年，卷（期）: 2010,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 8-11
• 页数: 4页
• 分类号: Q78
• 字数: 3118字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-9960.2010.01.003

摘要

目的 获得人孤儿G蛋白偶联受体(oGPCR)与G蛋白α亚基(Gi1α)的融合基因及其表达蛋白.方法 采用RT-PCR法,从人HepG2细胞扩增oGPCR成员GPR45,GPR85,GPR174和Gi1α的完整表达序列,运用重叠延伸PCR法扩增得到人oGPCR成员GPR45, GPR85, GPR174 分别与Gi1α的融合基因,将各融合基因与供体质粒pFASTBac1重组,而后分别转化DH10Bac菌株获得杆状病毒穿梭杆粒,制备重组杆状病毒并感染Sf9细胞,收获融合蛋白,经Western印迹鉴定.结果 得到了上述oGPCR成员的融合基因oGPCRs-Gi1α,并使之在昆虫细胞成功表达,制备了足量的oGPCRs-Gi1α融合蛋白.结论 oGPCR可与Gi1α成功融合,昆虫细胞表达体系是制备融合蛋白的理想手段,为今后深入开展oGPCRs的相关研究提供了保障.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	高月	军事医学科学院放射与辐射医学研究所	102	2247	28.0	43.0
2	韩春光	军事医学科学院放射与辐射医学研究所	26	91	6.0	8.0
3	刘永学	军事医学科学院放射与辐射医学研究所	67	624	11.0	23.0
4	彭明丽	军事医学科学院放射与辐射医学研究所	1	0	0.0	0.0
5	高志清	军事医学科学院放射与辐射医学研究所	4	5	1.0	2.0
6	王琼	军事医学科学院放射与辐射医学研究所	7	94	3.0	7.0